過小孤山大孤山精選(九篇)

前言：一篇好文章的誕生，需要你不斷地搜集資料、整理思路，本站小編為你收集了豐富的過小孤山大孤山主題范文，僅供參考，歡迎閱讀并收藏。

第1篇：過小孤山大孤山范文

[關鍵詞] 天麻素；氯化鈷；皮質神經元損傷；神經保護；缺血缺氧性腦損傷

[中圖分類號] R332 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2016）05（b）-0017-04

[Abstract] Objective To study the repair effect of gastrodin on hypoxic brain neurons damage induced by cobalt chloride in rats， and provide an experimental reference for clinical treatment of ischemic and hypoxic brain damage. Methods Cerebral cortex nerve cells of SD rats were selected for study. The original generation after 7 d， they were numbered according to the culture dish. Primary cells were divided into blank control group， model group， gastrodin group and gastrodin control group by using random number table method， and corresponding treatment was implemented. Cell morphology， neurons relative vigor， lactate dehydrogenase （LDH） release quantity， EphA4 expression difference among four groups were observed. Results The relative activity of neurons in blank control group was significantly higher than that in other groups， the relative activity of neurons in model group was significantly lower than that in gastrodin group and gastrodin control group， the relative activity of neurons in gastrodin group was significantly lower than that in gastrodin control group （P < 0.01）. The neurons LDH activity of model group was significantly higher than that of other groups， the neurons LDH activity of gastrodin group and gastrodin control group were significantly higher than those of blank control group （P < 0.01）. The average neurons IOD of model group was higher than that of other groups， the average neurons IOD of blank control group was lower than that of other groups （P < 0.01）. Conclusion Gastrodin can reduce the expression level of EphA4 in the injured neuron， inhibit the activity of LDH in neuronal cells， and enhance the cell relative viability， has a positive effect on the protection of rat cortical neuronal injury， is worthy of further study.

[Key words] Gastrodin； Cobalt chloride； Cortical neuron injury； Nerve protection； Hypoxic ischemic brain damage

缺血缺氧性腦損傷的病理過程包括能量代謝障礙、細胞內鈣超載、興奮性氨基酸分泌過多及一氧化氮蓄積等，上述病理反應引發的級聯細胞毒作用是誘發神經元損傷的主要原因[1]。目前已有大量西藥相繼應用于神經元損傷的預防及治療，其臨床效果得到了一定認可，但伴隨而來的明顯副作用大大限制了其應用前景[2]。天麻素的強效鎮痛、鎮靜、心血管功能改善、抗炎及抗自由基作用已被廣泛證實，研究表明，天麻素還具有增強血管順應性作用，有望改善臟器缺血缺氧狀態、發揮腦保護作用[3]。本研究就天麻素對神經元損傷的影響進行實驗分析。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

實驗動物：出生24 h內健康新生SPF級SD大鼠，由鄭州大學醫學院動物實驗中心提供，動物合格證號：120000KXWQR08001。

主要藥品：天麻素（昆明制藥集團藥物研究所生產，100 g/瓶，批號：20130115，分析純），純度99.5%，分子量286.27，其化學結構式如圖1所示。

主要試劑：Neurobasal培養基（美國Gibco公司生產）、B27試劑（斯百匯生物科技有限公司，規格：10 mL）、胎牛血清（美國Gibco公司生產，規格：500 mL）、胰蛋白酶（蘇州亞科科技股份有限公司，型號：9002-07-7）、多聚賴氨酸（上海寶曼生物科技公司，濃縮液，25 mg/瓶）、氯化鈷（CoCl2，山東淄博潤興化工廠生產，分析純）、3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2、5-二苯基四氮唑溴鹽（MTT）（美國Sigma公司，分析純）、乳酸脫氫酶（LDH）定量檢測試劑盒（美國羅氏公司）、抗鼠人肝癌細胞系A4（EphA4）多克隆抗體（美國Santa Cruz公司）、CY3熒光試劑盒（武漢博士得生物制品公司），其他試劑均為進口分析純。

1.2 處理方法

1.2.1 大鼠皮質神經元細胞原代培養 使用75%乙醇消毒實驗大鼠，在嚴格無菌條件下，行神經元細胞原代培養[4]，持續7 d。

1.2.2 細胞分組及處理 將原代培養7 d后的細胞按照培養皿編號，使用隨機數字表法分為空白對照組、模型組、天麻素組及天麻素對照組，以125 μmol/L CoCl2溶液處理模型組及天麻素組細胞4 h，然后以25 mg/L天麻素處理天麻素組、天麻素對照組細胞24 h[5]。

1.3 觀察指標

1.3.1 神經元形態觀察 于倒置顯微鏡下，對各組細胞神經元形態變化進行拍照、觀察，并比較。

1.3.2 細胞相對活力檢測 采用MTT法，對各組細胞相對活力進行檢測[6]，使用全自動酶標儀，檢測其570 nm波長處吸光度（OD）值。

1.3.3 LDH活性檢測 LDH活性檢測采用速率法[7]，檢測其440 nm波長處OD值。

1.3.4 EphA4表達量檢測 采用細胞熒光化學法，對各組細胞EphA4表達量進行檢測[8]，紅色熒光即為免疫陽性細胞。使用Image-Pro Plus 6.0軟件，對各實驗組的熒光圖片單個細胞的累積吸光度（IOD）值和平均IOD值進行分析并比較。

1.4 統計學方法

采用SPSS 18.0統計軟件對數據進行分析和處理，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，多組間比較采用方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗，以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 神經元形態

倒置顯微鏡觀察結果示，空白對照組神經元形態均勻一致，大小相仿，胞體飽滿，呈光滑的橢圓形或錐形，神經元的突起廣泛分枝，相互交叉，折光性強；模型組神經元形態發生明顯改變，細胞折光性下降，胞體萎縮，出現顆粒，軸突變細變短，形狀僵硬，分枝減少；天麻素組神經元形態較模型組有所改善，胞體萎縮減輕，軸突保留較多，但仍有少數細胞壞死；天麻素對照組形態較對照組稍差。見圖2。

2.2 細胞相對活力

空白對照組神經元細胞相對活力顯著高于其他各組，模型組神經元細胞相對活力顯著低于天麻素組、天麻素對照組，天麻素組神經元細胞相對活力顯著低于天麻素對照組，差異有高度統計學意義（P < 0.01）。見圖3。

2.3 LDH活性

模型組神經元細胞LDH活性顯著高于其他各組，天麻素組、天麻素對照組神經元細胞LDH活性顯著高于空白對照組，差異有高度統計學意義（P < 0.01）。見圖4。

2.4 EphA4表達

熒光顯微鏡觀察結果示，各組神經元胞體、突起均可見紅色熒光顯示，但各組熒光強度存在一定差異。模型組神經元平均IOD值顯著高于其他各組，空白對照組神經元平均IOD值顯著低于其他各組，差異有高度統計學意義（P < 0.01）。見圖5和圖6。

3 討論

缺血缺氧性腦病存活患者病殘率高達75%，這與腦組織缺血缺氧引發的神經細胞死亡，繼而導致的神經功能缺損具有密切關聯[9-10]。因此，臨床亟需一種能夠有效保護神經元功能、避免神經元損傷的藥物。

天麻素是我國傳統中藥材天麻中的主要有效成分，已有大量研究證實，天麻素具有恢復大腦皮質興奮與抑制過程間平衡失調等作用[11]。研究表明，天麻素還可通過抑制興奮性氨基酸誘導的細胞凋亡過程，在清除自由基、對抗自由基誘導的細胞損傷、神經保護等方面發揮積極效果[12]。本研究結果示，經CoCl2處理后，模型組、天麻素組神經元細胞均出現了不同程度的形態學變化，以胞體萎縮、細胞壞死為主，說明天麻素具有一定的神經保護作用。

在天麻素神經保護作用機制的研究中發現，模型組神經元細胞相對活力最低，但其LDH活性最高，說明模型組神經元細胞存在明顯損傷，而天麻素在一定程度上使CoCl2誘導的化學性損傷得到抑制，考慮與天麻素在對抗興奮毒性、雙向調節一氧化氮和一氧化氮合酶、促進膠質細胞產生營養因子、穩定胞膜、抗細胞氧化等方面發揮的積極作用有關[13]。大量LDH的漏出表明，神經細胞膜完整性受損，且Cai等[14]研究證實，LDH活性與神經細胞損傷程度呈正比，故本研究結果示，天麻素處理后神經細胞LDH漏出量顯著降低，提示天麻素對細胞膜完整性的維持亦具有一定作用。

此外，本研究發現，經CoCl2處理后，模型組細胞EphA4表達水平顯著升高，而天麻素可使細胞EphA4表達水平得到明顯控制，與何保麗等[15]研究結論一致。作為一種具有影響突觸可塑性的基因，EphA4廣泛分布于大腦各個區域，并集中于海馬錐體細胞樹突棘部位，研究表明，配體Ephrin-A3可激活EphA4，誘發下游信號轉導級聯瀑布，導致樹突棘瓦解，使成熟大腦突出的重構能力得以保存[16-18]，因此，EphA4在缺血缺氧損傷后神經元的損傷中扮演了重要角色。本研究天麻素組細胞EphA4表達得到有效抑制，說明經天麻素處理后，EphA4參與的CoCl2誘導神經元損傷過程得到了有效控制，細胞自我保護現象有所降低，神經元重構能力得以保存，從而有效延緩了神經元損傷過程[19-20]。

綜上所述，天麻素能夠有效抑制CoCl2誘導的大鼠皮質神經元損傷，其保護作用可能與EphA4表達抑制有關，為缺血缺氧性腦損傷的臨床治療開拓了新的研究方向，但其具體作用機制有待進一步深入觀察。

[參考文獻]

[1] Song C，Fang S，Lv G，et al. Gastrodin promotes the secretion of brain-derived neurotrophic factor in the injured spinal cord [J]. Neural Regen Res，2013，8（15）：1383-1389.

[2] Zhang M，Liu Y，Yu H，et al. A potential method for recycling of gastrodin separated from urine [J]. Asian J Chem，2013，25（8）：4603.

[3] 楊汀，樊光輝.天麻素治療神經系統疾病機制研究進展[J].華南國防醫學雜志，2013，27（2）：131-132.

[4] Zhang F，Li A. Dual regulating effects of gastrodin on extracellular dopamine concentration in rats models of Tourette's syndrome [J]. Int J Neurosci，2015，125（10）：784-792.

[5] 位凱，王飛，張瑾，等.天麻素預處理減輕大鼠心肌缺血再灌注損傷的可能機制[J].安徽醫科大學學報，2014，49（6）：756-758.

[6] Sun G，Yuan Z，Zhang B，et al. Gastrodin blocks neural stem cell differentiation into glial cells mediated by kainic acid [J]. Neural Regen Res，2012，7（12）：891-895.

[7] 陳偉康.天麻素注射液的藥理作用與臨床應用進展[J].海峽藥學，2013，24（11）：13-16.

[8] Wang X，Yan S，Wang A，et al. Gastrodin ameliorates memory deficits in 3，3′-iminodipropionitrile-induced rats：possible involvement of dopaminergic system [J]. Neurochem Res，2014，39（8）：1458-1466.

[9] Jiang G，Wu H，Hu Y，et al. Gastrodin inhibits glutamate-induced apoptosis of PC12 cells via inhibition of CaMKII/ASK-1/p38 MAPK/p53 signaling cascade [J]. Cell Mol Neurobiol，2014，34（4）：591-602.

[10] 梅梅，王顯鶴，孫華威.白藜蘆醇對缺氧缺血性腦損傷新生大鼠MMP-9及TIMP-1的影響[J].中國現代醫生，2015，53（9）：6-7，15.

[11] 章正祥，曹克剛，王春丹，等.天麻素對多巴胺，硝酸甘油誘發的血管舒縮異常模型大鼠神經肽，一氧化氮系統的影響[J].中華中醫藥學刊，2013，31（7）：1514-1517.

[12] Liu W，Su BL，Wang ZS，et al. Gastrodin improved baroreflex sensitivity and increased gamma-amino butyric acid content in brains without decreasing blood pressure in spontaneously hypertensive rats [J]. CNS Neurosci Ther，2012，18（10）：873-875.

[13] 吳迪，陳冠婕，彭正午，等.天麻素對腦缺血再灌注模型小鼠大腦及紋狀體髓鞘的保護作用[J].中華行為醫學與腦科學雜志，2015，24（3）：198-200.

[14] Cai Z，Lei X，Lin Z，et al. Preparation and evaluation of sustained-release solid dispersions co-loading gastrodin with borneol as an oral brain-targeting enhancer [J]. Acta Pharm Sin B，2014，4（1）：86-93.

[15] 何保麗，角建林，李波，等.天麻素對老年癡呆樹海馬BDNF表達的影響[J].昆明醫科大學學報，2013，34（9）：29-30.

[16] 張暉芬，陳曉輝，霍艷雙，等.RP-HPLC雙波長切換法同時測定天舒膠囊中天麻素、阿魏酸和6，7-二羥基藁本內酯的含量[J].沈陽藥科大學學報，2012，29（6）：443-447.

[17] Li C，Chen X，Zhang N，et al. Gastrodin inhibits neuroinflammation in rotenone-induced Parkinson's disease model rats [J]. Neural Regen Res，2012，7（5）：325-331.

[18] 何小波，王曉燕.天麻素聯合多奈哌齊治療血管性癡呆療效分析[J].實用老年醫學，2014，28（7）：580-582.

[19] Zhao GW，Wang Y，Li YC，et al. The neuroprotective effect of modified “Shengyu” decoction is mediated through an anti-inflammatory mechanism in the rat after traumatic brain injury [J]. J Ethnopharmacol，2014，151（1）：694-703.

第2篇：過小孤山大孤山范文

一、把握課堂教學機會，組織學生參與口語訓練

在高中語文人教版的教材中，有很多的篇目都是非常好的口語訓練教材，這就要求我們要注重挖掘整合教材中的信息，充分利用好教材。語文課本中有許多古代詩歌散文欣賞、先秦諸子選讀等，教師應根據各個不同單元的內容，在教學設計的過程中充分考慮到口語訓練的因素，進行形式多樣的口語交際訓練活動。

《沁園春·長沙》這首詞呈現出一種色彩斑斕、生機勃勃的美，一種催人奮發、給人以力量的美。在教學過程中，我們就可以把口語訓練融入到課文教學中來。首先，強調課文朗讀。播放電視劇的視頻——勵志電視劇《恰同學少年》中的片段，創設情境，引導學生找出詞中抒發作者情感的句子，帶著感情大聲朗讀，體會青年所具有的革命英雄氣概，胸懷著激濁揚清、改天換地的鴻鵠之志。其次，讀詞說話。以作者的情感態度是通過哪些景物體現出來、景物是如何體現情感、組成了一幅怎樣的畫面為內容互相回答。這樣既教給了學生鑒賞詩歌的基本方法，又提高了學生的口頭表達能力。再次，我思我想。詩人通過遠眺、近觀、仰望、俯視看到的紅葉、綠水、藍天、白帆、雄鷹、游魚，給我們描繪了一幅生機盎然，色彩絢麗壯美的秋景圖，體現了巍峨、博大、壯闊的崇高美表現出了詩人寬廣的胸襟。那么，我們呢？哪些風景也曾深深地撥動過我們的心弦？作為高一的新生，感受著年輕詞人不畏驚濤駭浪、力挽狂瀾的英雄氣概的同時，我們能做什么呢？把課堂內容和生活融為一體，串起學生的過去和未來。

在單獨篇目的教學設計要注重口語訓練的同時，我們也要善于整合教材，把課文按某個主題做個歸納，進行口語教學。如《過小孤山大孤山》《游褒禪山記》《滕王閣序》《蘭亭集序》《項脊軒志》等都可以根據課文內容客串導游作為介紹景點的形式來進行；《過秦論》《六國論》《阿房宮賦》《小狗包弟》等以辯論的形式來進行；《記梁任公先生的一次演講》《我有一個夢想》《熱愛生命》《樂民之樂憂民之憂》等以演講的形式來進行；《荷塘月色》《春江花月夜》《登建康賞心亭》《登岳陽樓》《蜀道難》《將進酒》等朗誦比賽的形式來進行。這些都是很好的口頭訓練材料。我們在教學的時候充分地利用，一定能起到意想不到的效果。

二、創設特定的氛圍，寓教于“樂”，激趣，鍛煉學生的口語

學生的口語能力訓練需要一些特定的環境，讓學生處于這種環境中去學習、練習，要讓學生有話可說，有感而發，這就要求教師要為口語訓練創設情境。學生一般都有一種好奇心，教師可以利用這種心理來舉辦一些活動，來訓練學生的口語表達能力，通過活動來培養學生口語表達的準確性和思維的敏捷性，讓學生在游戲活動中得到鍛煉。如，成語“口蜜腹劍”，我在黑板上寫成“心蜜腹劍”，學生發現應該是把“心”改為“口”，并總結成另一個成語“口是心非”來表達原成語的錯誤所在。這種游戲活動，學生的參與率高，人人有機會，課堂氣氛空前高漲，自己沒有能總結出的成語，聽了其他同學的總結，既提高了成語的積累又鍛煉了口語表達能力。為了培養學生吐詞清楚、歸音正確，還可以不定期的舉辦繞口令比賽，先讓學生課后找到一些比較有興趣的繞口令，再給學生一定的時間進行練習，最后在課內進行繞口令比賽，這種方法對幫助學生練習吐詞、歸音很有作用。

演講也是訓練學生口語交際能力的一種有力的手段，演講過程中有敘述的部分也有議論的部分，邏輯性比較強。在最初準備演講稿的時候，如何讓意思表達更加清晰，往往需要在心腦中醞釀很久，有時還需要在心中默默的朗誦幾遍。演講的內容可以是學生針對某些社會熱點進行演講，如《學生為什么不可以上網吧》《我被老師批評錯了怎么辦》《學生就是只要成績好就行了嗎》《學生用手機的危害》等。也可結合課本中學習的文章進行。如，學習了《我有一個夢想》《記梁任公先生的一次演講》等課文之后，可讓學生模擬課文內容進行演講練習。這些內容在學習之后，學生的理解比較到位，所以表演起來比較形象，學生的興趣也高，對于學生來說還是比較受歡迎的。