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近年來,各級疾病預防控制機構衛生檢驗實驗室陸續進行改造建設或重新建設,其中,有相當多的基層衛生檢驗實驗室采取對原辦公大樓或舊實驗室進行改造的方案。這在多數情況下是一個減少工程量、節省費用、工期短的理想方案,但在現有的建筑基礎設施條件下進行實驗室改建,并符合特殊的衛生檢驗實驗室專業要求、規范,使得實驗室改建成為一個復雜的過程,改建所面臨的特殊性和應變能力對實驗室管理者提出了很大的挑戰[1]。到目前為止,還沒有專門的衛生檢驗實驗室改造、建設的綜合性論著可供借鑒。本文結合本中心實驗室改建工作實踐,對基層衛生檢驗實驗室改建的若干問題進行探討。
1改造前衛生檢驗實驗室的狀況
1.1本實驗室是七十年代后期建成,八十年代和九十年代又陸續進行了小修小改,實驗室只有簡單的工作分區、簡易的基本工作臺(混凝土臺面,木框結構)、簡陋的無菌間(角鐵框玻璃結構)。本次改造,要將原實驗室(不足400m2)和舊辦公室改造建設為理化檢驗室、微生物檢驗室、臨床檢驗室三大功能分區的綜合衛生檢驗實驗室,并達到通過國家實驗室認可等資質認證、認可的要求。
1.2由于工作用房不足,精密儀器、普通儀器、專用儀器擺放無分區,甚至部分儀器設備堆放在實驗室走道中。早期的實驗室基本沒有把網絡、電話、監控、消防、門禁、噴淋等設施納入設計方案中,各自獨立,檢修維護困難。
1.3水、電、氣管線無規劃,臨時拉設為主,強、弱電沒有分開。排氣、排毒系統設計不合理,效果不好。空調系統出風口設置不合理,風口對著儀器設備,影響儀器正常工作。
1.4辦公區與實驗區交叉,樣品庫與試劑庫沒有嚴格分隔,工作流程不合理,安全設施不足,存在較大的安全隱患。
2改建衛生檢驗實驗室的難點
2.1由于是利用辦公室和舊實驗室進行改造,改建時受到原有的建筑結構、布局的制約。
2.2檢驗人員一般是從事具體檢驗工作,沒有實驗室改造、建設的經驗,視角較窄,無法形成科學、全面、合理的需求報告。
2.3可利用的國家衛生檢驗實驗室技術規范、技術標準不完整,缺口較多。現有人員均沒有實驗室設計、工程規劃、設計、管理和招標管理經驗,很容易出現施工過程中增加、更改項目過多,超預算過多的情況。
3改建衛生檢驗實驗室的工作思路
3.1需求分析是實驗室改建前期工作的核心[2]。做好需求分析關系到實驗室改建的最終結果,在需求分析時必須考慮改建的規模、規格和經濟能力。要符合衛生檢測實驗室質量控制體系的要求,符合法律法規對衛生檢測實驗室必須的資質認證、認可的要求。
3.2實驗室改建工作要因地制宜,講求實用,量力而行,設計嚴謹,預算中要留有余地(在改建項目中,不可預見開支往往達到20%甚至更高)。改建工作必須考慮消防、環保、職業危害等特殊要求,提前做好申報。
3.3實驗室改建的設計指導思想應考慮整體風格統一,突出重點和特色,美觀得體,易于監控觀察,易于安全管理。在設計階段就要考慮留有一定的發展空間,特別是職能要求的但改建時未能開展的,要進行論證,預留發展空間,要考慮日后維護和維修易于進行,使用的材料也應考慮日后的維護成本。
4做法
4.1組織專門機構成立實驗室改建工作領導小組,由中心主任擔任組長,成員有理化檢驗,微生物檢驗,臨床檢驗,財務、信息、水電維護、儀器維修等不同專業人員,下設實驗室改建辦公室,全面負責實驗室改建的所有工作,該辦公室是實驗室改建工作的關鍵部門,我中心特選擇一名具有一定專業能力的具有建筑學知識的衛生工程專業技術人員擔任改建辦公室主任。
4.2前期調研前期調研的核心是做好需求分析,其關系到實驗室改建后能否滿足疾病預防控制工作對衛生檢測實驗室的需要。要向實驗室使用者和相關人員通報實驗室改建計劃,建設目標,經費預算和籌措方案,改建規模、規格,未來五到十年的發展設想等。如何讓大家提出需求,提出什么樣的需求,如何讓需求提出者提出既現實又有遠見、既便于工作又符合技術規范的需求,是實驗室改建工作領導小組和實驗室改建辦公室的首先要解決的問題。要組織相關人員參觀各類實驗室。既參觀高水平的綜合性實驗室,又參觀不同檔次的專業實驗室,還參觀一些民營實驗室。參觀人員必須做好分工,明確觀察內容,觀察內容至少包括布局、結構、流程、使用材料、專用設備、實驗室家具、排毒通風柜、安全設施、消防設施等。
4.3收集需求報告,進行需求分析根據我們的經驗,做需求分析時還必須注意以下幾點:⑴需求報告不僅向檢驗人員征集,還要向維護維修、后勤、供應、質量管理、衛生監測、信息工程等不同專業的人員征集,盡可能全面,只要有工作關聯,都要征詢到;⑵所有的需求報告均應以文字、圖紙等書面形式提出來;⑶需求報告指定專人負責收集、歸納、總結;⑷各種需求,可能會出現不盡合理,不符合技術規范,不符合建筑結構要求等情況,所以匯總后的需求報告應組織檢驗人員討論會、專家論證會和裝修設計、水電安裝、實驗室家具、財務管理等各種專業人員咨詢會的方式來確定取舍。
4.4根據實驗室改建計劃、目標、經費預算和論證后作出的綜合需求分析報告,請專業設計公司做出初步的總體規劃草圖、各實驗室功能布局草圖、上下水、強弱電、燈光和各類氣體管道布局草圖、排毒通風柜、實驗臺、安全設施、消防設施等布局、選材草案等。
4.5組織使用科室專業技術人員和實驗室相關的維護、后勤、供應、質量管理、衛生監測、信息工程等人員反復討論和修改草圖草案,也可同時邀請上級專家參與論證。這是一個反復多次的過程,有的草圖甚至反復修改了10多次。
4.6平面設計圖的確定經反復修改后的平面設計圖確定后,應由使用科室負責人和改建辦公室負責人簽字確認,送中心主任審查簽字后加蓋單位公章定稿。由于衛生檢驗實驗室涉及的技術規范、標準較多,結構復雜,除了設計圖外,我們還增加了一份設計說明和參考標準規范目錄為附件。
4.7整理完善改建方案后,擬定衛生檢驗實驗室改建立項申請報告,向主管部門申報,辦好有關的審批手續,并按程序進行采購招標,標書中一定要寫清楚技術要求和技術指標,對一些重要的材料和設備要有明確規定,以免在施工階段引發爭議,造成不應有的損失。#p#分頁標題#e#
4.8施工在施工過程中,改建辦公室主任同樣起到重要的核心作用。一要嚴格把關,二要做好施工單位、監理單位、設計單位和使用科室的及時溝通。由于實驗室改建的復雜性和困難性,要及時解決施工過程中出現的設計階段未考慮到的各種問題,盡量減少因四方協調不足而造成延誤工期、大量增加變更項目等情況出現。
4.9試運行和驗收實驗室改造建設完成進入試運行時,可能會發現很多問題,要及時收集并及時同設計單位、施工單位通報,要求及時糾正或解決,否則不予通過驗收。
5結果
通過連續幾年的實驗室改建,我中心衛生檢驗實驗室使用面積增大到1100m2,硬件建設已達到地區的先進實驗室水平,先后通過了國家實驗室認可(CNAS),計量認證資質認定(轉版),省衛生廳“衛生監督檢驗檢測機構資質認定”,“職業衛生技術服務資質認定”等認可認證。
6討論
6.1利用辦公室和舊實驗室改建成新的衛生檢驗實驗室,我們采用半島式或靠邊式實驗臺布置,首先解決實驗室改建受到原有的建筑結構、布局的制約的困難。實驗臺半島式或靠邊布置不需設地溝、不穿樓板,可預留檢修口,上下水、強弱電均便于安放。缺點是靠內墻一側容易光線不足,要增加人工采光。
6.2實驗室空間分隔我們采用綜合式大、小空間結合的方式,室內間斷采用玻璃等材料,使特殊用途和一般用途功能有機結合起來,具有一定的空間靈活性,減少實驗室內的空間壓迫感,并很容易地對實驗室工作情況進行觀察。
6.3關于實驗室設不設吊頂天花。裝上吊頂天花可以屏蔽實驗室頂部的管線,改善視覺。不裝吊頂天花可以保證實驗室的有效高度,比較容易適應實驗室實驗儀器設備不同要求,具有足夠的靈活性以適應變化的需求,便于維護檢修,減少工程造價。據我們參觀掌握的資料和向國外同行了解的情況,最終我們決定實驗室全部不裝吊頂天花。實踐證明,只要在實驗室頂部管線排布的設計、施工中抓緊抓好,不會對實驗室上空的美觀造成太大的影響。
衛生檢驗質量控制是全面質量管理的重要環節,是檢驗結果準確、及時、有效的保證。影響衛生檢驗質量控制的環節較多,因素復雜,而檢驗前階段的質量控制是整個衛生檢驗質量控制中一個容易被忽視卻非常重要的環節。筆者就人員、實驗器皿、實驗用水、試劑和標準溶液、樣品、儀器、設施和環境以及檢驗樣品的計劃性等八個方面對如何做好分析前階段的衛生檢驗質量控制進行探討。
1人員的準備
檢驗人員在測定樣品中的某一項目前,首先要認真查閱各類相關標準,然后對比本實驗室具體條件進行選擇,最好選用國家標準,無相應國家標準時要做預實驗進行驗證。同時應熟悉所將采用的檢測方法以及測試中的每一個步驟,掌握實驗過程中產生的現象,對可能產生的偏差能進行分析并做好預防。
2實驗器皿的準備
實驗器皿的準備關系到實驗的成敗,玻璃儀器的洗滌可先用自來水浸泡和沖洗,再用洗滌液浸泡洗滌,然后用自來水沖洗干凈,最后用純水淋洗3次,洗凈后的器皿內壁應能均勻地被水潤濕,如果發現有小水珠或不沾水的地方,說明容器壁上有油垢,應重新洗滌。冼好后晾干的器皿應及時放入柜中,以防灰塵等污染。對于不同實驗后留下的難處理器皿可根據污垢的不同化學性質加以不同的處理。例如:肥皂液、堿液及合成洗滌劑可用于洗滌油脂和有機物;氫氧化鉀酒精溶液(100g/L)適用于洗滌油垢、樹脂;酸性草酸或酸性羥胺洗滌性適用于洗滌氧化性物質;硝酸溶液適用于測定金屬離子。洗滌時應防止受到新的污染,如測鋅、鐵的玻璃器皿酸洗后不能再用自來水沖洗,應直接用純水沖洗,測氨和碘化物用的器皿洗凈后應浸泡在純水中。
3實驗用水的準備
實驗用水是檢測的最基本條件,要根據實驗項目及使用的儀器選擇不同的實驗用水,根據GB/T6682要求,一般化學分析用三級水(電導率≤5μs/cm),高靈敏度微量分析使用二級水(電導率≤1.0μs/cm),超痕量分析使用一級水(電導率≤0.1μs/cm)。對于像石墨爐原子吸收分析,必須使用重蒸餾水,否則測定空白值高、樣品和重復性進樣結果偏差很大,無可比性。由于純水貯存期間,可能會受到實驗室空氣中CO2、NH3、微生物和其他物質以及來自盛水容器壁污染物的污染,因此,一級水應在使用前新鮮制備,二三級水貯存時間也不易過長。另外一些試劑的配制還需特殊制備的實驗用水,例如需煮沸制備的無二氧化碳水、需加硫酸和高錳酸鉀重蒸餾制備的無氨水、需加氫氧化鈉至pH=12以上重蒸餾制備的無酚水等,因此要根據具體情況制備符合要求的實驗用水。
4試劑和標準溶液的準備
試劑在配制前應觀察其是否變質,是否已潮解、風化等,不確定時必須作預試驗。試劑的純度對實驗的影響很大,對于一般的實驗用分析純即可,但對于要求比較高的,比如標準物質必須用優級純或基準物質。對于檢測標準上要求要臨用前配制的試劑及標準應用液一定要現配現用。標準溶液的準確與否對測定結果有直接的影響,應嚴格按照GB/T601-2002《化學試劑標準滴定溶液的制備》中有關規定,掌握標定技術。
5樣品的準備
樣品的代表性、有效性和完整性直接影響檢測結果,樣品的采集方法、容器、數量、運送條件以及開檢時間都有嚴格的規定,不同樣品的要求不同,對這些要求要嚴格遵守,例如,測水中氰化物要用硬質玻璃瓶、加氫氧化鈉至pH=12以上、24h內測定,而水中金屬則需聚乙烯瓶加硝酸至pH=2以下、14d內測定,如果不注意采樣的這些細節,將會使實驗結果產生巨大偏差。對于檢驗來說,樣品不通過預處理直接測定最為理想的,因為在預處理中難免會使樣品污染、損失,因此選擇一合理的預處理方法是至關重要的,要根據其檢測項目、樣品種類及狀態來選擇不同的預處理方法。
6儀器的準備
樣品檢測前應對要使用的的儀器進行檢查。了解上次使用情況、儀器設備檢定或校準的資料以及外部設備(包括水、電、氣)是否完好等,并提前做好儀器正常工作的各項準備。
7設施和環境的準備
實驗室設施和環境條件要考慮到實驗室合理布局、通風、照明、溫濕度、實驗室合理潔凈度、儀器電源的穩定性、可靠接地等是否符合檢驗工作的需求,同時應考慮停水、停電、防火、防盜對實驗安全的重要性,并給予充分的保障。不同的實驗有不同的環境要求,例如恒重時要求室內濕度要低,用二乙氨基二硫代甲酸銀分光光度法測砷時要求避光且室溫大于15℃。同時區域間的檢驗工作相互之間有影響時,應采取相應的措施,例如做水中氨氮時應避免在同一實驗室使用氨水。
8檢驗樣品的計劃性
1關于公共衛生檢驗體系
建立公共衛生檢驗體系非常重要。這個體系對于疾病預防控制和采取措施控制突發公共衛生事件提供了技術上的支持,它包含了多門學科及專業,如分析化學、預防醫學、儀器分析、有機無機化學等,可以說是一項專業及相關技術高并且涉及科學理論的工作。這項工作的最主要的任務是協助流行病調查和各種防治技術,通過開展多種方法的監測對突發公共衛生事件進行控制,而對于那些新發現的各種傳染病的病源追溯和排查,必須要開發新型的健康相關產品。公共衛生檢驗體系中的疾病預防控制機構所需要的硬件設備大多是專業實驗室、相關的理化檢驗實驗室、跟疾病相關的病原學、毒理學實驗室以及衛生微生物檢驗實驗室等。
2建立公共衛生檢驗體系的必要性和意義
隨著人們生活水平的提高,所涉及到的衛生服務的范圍更廣,服務質量和技術水平更高。因此建立公共衛生檢驗體系是我們國家經濟發展的情勢使然,所以增強公共衛生體系建設意義重大。加強黨的執政能力建設的緊迫任務。加強黨的執政能力建設是人民的要求,時代的要求。我們黨的力量源泉和勝利之本在于廣大人民群眾的擁護和支持,只有為人民服務,執政才能執得好。公共衛生的核心任務是以最大的力度對疾病做到有效預防和保護公民的健康安全,這也關系到我們黨的執政地位是否鞏固。全面加快公共衛生體系建設,堅持權為民所用,利為民所謀。
是構建社會主義和諧社會的重要內容。以人為本,站在時代的高度,開拓發展思路是實現我國現代化建設的現實要求和最根本指導方針。健康是人類之本,沒有健康就沒有一切,從這個角度上來講公共醫療和衛生關乎到廣大人民群眾生命健康,而疾病嚴重危害人民群眾的健康,制約經濟的發展。
是強化政府社會管理責任的需要。社會在進步,經濟在發展,這使人們對公共服務要求越來越高,顯而易見的是經濟的發展絕不能忽略了教育、科研、公共衛生。因此,公共服務是現代政府的第一要務,建立公共衛生體系,是強化政府社會管理責任、深化政府行政管理體制改革的關鍵。
是推動經濟持續快速健康發展、保持社會穩定的基礎和保障。公共衛生檢驗體系建設直接影響社會安全和穩定。公共衛生檢驗當然不會只是衛生問題,它還關乎到社會的安定、國家的經濟發展。而要想使社會保持穩定與持續健康發展,當然就離不開公共衛生事業,而一個國家的人民健康是保障社會穩定和發展的基礎。國家只有增強對公共衛生檢驗事業的投入,才能有效地促進社會經濟發展。而建立完善的公共衛生檢驗體系,能把疾病控制在預防階段,因此,國人要實現社會的穩定和經濟持續發展,當然要依靠堅實的公共衛生檢驗工作。
3構建公共衛生檢驗體系的策略
在疾控中心實驗室的基礎上,強化我國政府職能,公共衛生檢驗單位是政府部門提供技術支撐的社會公益類事業單位,主要負責全市病原微生物、微生物產生的毒素、病原寄生蟲、病媒生物的檢測。負責日常的流行病、地方病、傳染病的調查檢測、通過科研工作促進防病檢驗技術上的發展,負責突發公共衛生事件的檢測工作。做好技術儲備,對一些檢測技術要求高,設備昂貴及運行成本大的項目,由各醫療部門上送到該實驗室進行統一檢驗,更好地節約資源,促進我國醫療檢測和診斷水平的提高。
明確我國衛生檢測中心職能和任務。通過公共衛生檢測中心執行基礎性、方向性、前瞻性和源頭性的公共檢測研究與服務工作,負責突發公共衛生事件的檢測。另一方面,各政府職能部門平時進行的大量和重復性的檢測工作在原則上不在中心管理范圍,將根據市場化運作的原則,結合政府部門職能轉變和事業單位機構改革的要求,逐步轉移由具有相應資質的社會中介機構承擔。當前要在我國實行職能有機統一的大部門體制,因此我們要解放思想,總結我們自己的經驗以及借鑒國際上的成功經驗,為構建我國強大的公共衛生陣地,為推動我國疾控事業加快轉入科學發展軌道在實踐中探索前進。
1位驗時應注意如下幾個環節應該建立復核制,保證配制質量。對于培養基制造
1.1培養基廠所生產的千燥培養基出廠前應作靈敏度檢查。
培養基是藥品衛生檢驗的基本材料,其質量的
1.2干燥箱、高壓滅菌器、培養箱優劣直接關系到實驗的成敗。
若培養基被具有芽抱這些設備是對溫度或壓力調節要求很高的實驗的腐生菌所污染,常規高壓滅菌方法:難以消除。設備。實驗時若壓力、溫度標示不正確,會使實驗受這類細菌污染的培養基配制后立即用于實驗,實材料、培養基等滅菌不徹底或者微生物在培養箱內驗結果顯然不能成立,若配制培養基時弄錯培養基不能處于最適生長溫度而產生實驗誤差。對于這些設備,應該定期校正,尤其培養箱退度還應每夭記錄,以維持設備運轉正常。
1.3取樣方式和實驗操作時間
1990年版《藥品衛生檢驗方法》(以下簡稱《方法》)在“供試液制備”和“操作步驟”中雖然都提及供試液制備時混勻問題。但是對混勻方法無具體規定。實驗者如果忽視這一環節,會引起由于取樣不均勻,供試品稀釋度不正確并導致同一稀釋度幾個平板菌落數相差懸殊等情況。另外《方法》沒有規定從制備第一個1:10稀釋液到實驗完成的時間,結果會使實驗者一次實驗安排供試品過多,實驗操作時間過長,供試液污染的微生物可能生長繁殖而使測定結果偏高。據報道「‘1及筆者經驗,是否可以規定象液體供試品取樣前將藥瓶垂直翻轉25次,以保證取樣時供試液的均勻度。每次實驗供試品不宜安排過多,以2批為好,保證從第一個1:10稀釋液制備到各稀釋度樣品溶(懸)液的接種時間控制在20min之內。
1.4嚴格無菌操作
空氣凈化設備的應用,改善了藥品衛生檢驗工作環境。實驗應在有空氣凈化設備的無菌室內進行(要求一萬級,局部一百級),并定期進行空氣菌落數檢查,實驗自始至終嚴格無菌操作以防止實驗過程中的微生物污染。
1.5稀釋度
《方法》中規定一般應采用3級稀釋度以測定菌落數,然而有些實驗者任意減少稀釋度。筆者曾發現某些藥廠在作菌檢時僅選擇1級稀釋度進行實驗的情況,其后果有可能使已受微生物污染但含抑菌成分的供試品漏檢。因此,應嚴格按《方法》要求進行實驗。
2設立對照試驗
為進一步檢查培養基的質量與供試品溶液有無抑菌作用,《方法》規定應設置陽性對照與陰性對照試臉。
2.1飛陽性對照試驗
本試驗主要是為了排除藥品中有抑菌成分和防腐劑的千擾作用以及測試常規操作方法和培養基、試劑等的靈敏度。《方法》收載了本試驗,但是沒有明確規定何種情況下應設立。筆者認為,應該規定,凡屬新藥,作衛生檢驗應設陽性對照試驗,尤其對藥物成分較復雜的中成藥品種應注意。
2.2陰性對照試驗
2.2.1空氣菌落數檢查實驗過程中,在凈化工作臺上按左、中、右位置放3個肉湯瓊脂培養基平皿,暴露30min,30一35·C培養4sh,平均菌落數(1個。
2.2.2空白平皿對照試驗取滅菌空白平皿2個,在供試品傾注培養基時平行傾注相同的培養基,與供試品平皿同條件培養觀察,應無菌落生長。設立本試驗可以觀察同批經干熱滅菌的平皿、吸管、稱量紙(稱量瓶)等實驗器材滅菌是否徹底。
2.2.3稀釋液對照試驗分別吸取稀釋液lml注入2個滅菌平皿內,在供試品傾注培養基時平行傾注相同的培養基,與供試品平皿同條件培養觀察,應無菌落生長。設立本試驗可以觀察同批經濕熱滅菌的稀釋液、培養基等實驗材料的滅菌程度。
雖然影響藥品衛生檢驗實驗結果的因素很多,但是只要在實驗前、實驗中對各種因素加以控制,無菌操作規范、熟練,并設立對照試驗,無疑可以減少實驗誤差,保證實驗結果的準確性。
關鍵詞:食品 微生物學檢驗 質量安全 質量控制
Quality control of microbiological examination of food hygiene
Xing zeng wei1, You yong lai2, Liu ying3, Liang shao ming4
(1 Guangdong Lingnan Institute of Technology; 2 Conghua Entry - Exit Inspection and Quarantine Bureau; 3 Guangdong Vocational College of Environmental Protection Engineering Foshan; 4 Yaneng Bioscience (shenzhen) Co.,Ltd.)
Abstract: In this paper, how to enhance the quality control of microbiological analysis is discussed to improve the accuracy of result based on the following factors. These factors include analysts, laboratory environment, instruments and equipments, culture and key reagent, sampling and pretreatment, analysis process, result and report, laboratory inside and outside and so on.
Key words: Food; microbiological examination; quality safety; quality control
隨著對外貿易的蓬勃發展,進出口食品數量日益增加,國內外消費者對食品的質量提出了更高的要求,對食品的安全衛生問題日趨重視。通過加強微生物檢驗質量控制,可提高檢測結果的可信度,及時地反應出產品的衛生狀況,及早發現微生物的污染,并采取有效措施防止微生物危害,進一步用于監管部門監督生產,保證食品安全,對防止衛生不合格的食品進出口、保護消費者健康、維護“中國制造”的聲譽有著十分重要的意義[1]。同時也便于實驗室及時發現檢測過程中存在的問題,及時分析原因并解決問題,為量值溯源、糾正預防措施的實施提供見證,幫助完善實驗室質量管理,提高檢測水平等。中國合格評定國家認可委員會(英文縮寫:CNAS)在檢測和校準實驗室能力認可準則中明確規定實驗室應有質量控制程序以監控檢測和校準的有效性[2]。檢測和校準實驗室能力認可準則在微生物檢測領域的應用說明就質量控制活動也作出明確的規定[3]。雖然國家標準和出入境檢驗檢疫行業標準對食品衛生微生物學部分在方法、步驟等方面作了詳細的規定,但在實際檢驗中還存在著許多復雜的因素,如果忽視這些因素,很可能給檢驗結果帶來偏差甚至錯誤,從而無法正確判斷產品的衛生狀況,如何控制這些影響因素以保證檢驗結果準確性是日常檢驗中必須實施的工作即食品衛生微生物學檢驗的質量控制。
本文從檢驗人員的質量控制、環境和設施的質量控制、儀器設備的質量控制、培養基與關鍵試劑的質量控制、抽樣與樣品處理的質量控制、檢驗過程的質量控制、結果報告的質量控制、實驗室內外部的質量控制等方面,討論如何加強食品衛生微生物學檢驗的質量控制來提高結果的準確性。
1、檢驗人員的質量控制
微生物檢驗人員,必須具有嚴肅、認真的工作態度,具有較強的工作責任感,觀察事物要細致,有發現問題、解決問題的能力,身體健康、無不良的衛生習慣[4]。實驗室管理者應對各崗位人員進行授權,對從事微生物檢驗人員要求其具有的技術知識和經歷應能與其承擔的任務相適應,具備較強的“無菌”意識,熟練掌握微生物檢驗技術,對報告進行審核和簽發的技術管理者要求必須精通微生物學的全面知識。
檢驗人員應參加崗前培訓,包括檢測技術培訓、儀器設備使用維護保養培訓等,考核合格后方能上崗操作,平時還應經常參加各類培訓班、講座、研討會等,提高檢測技術水平,及時了解微生物檢驗的新技術和新方法。檢驗人員應掌握國家食品衛生微生物學檢驗方法、標準及相關法律法規,熟悉基本的計量學知識、計量標準、計量法令和法規以及有關的質量保證體系知識,能正確使用法定計量單位,參加各類比對試驗和盲樣測試,提高分析問題、解決問題的能力。定期對檢驗人員進行考核,實驗室也應指定專人對檢測人員的工作實施適當而且有效的監督,確保這些人員能依據實驗室的管理體系要求勝任其擔任的工作,不斷提高檢驗人員的素質。
2、環境和設施的質量控制
微生物檢驗室的設計原則應減少潛在的對檢驗人員的危害和對被檢樣品的污染。檢驗室布局宜采用單方向工作流程,避免交叉污染。檢驗區與辦公區分開,洗滌室、培養室、消毒間、無菌室應分開,無菌室的人流通道與物流通道應分開,采取有效的隔離措施并有明顯的標識,進行病原微生物分離鑒定工作應按要求配置二級生物安全檢驗室(BSL-2),確保所有檢測環境都有利于其工作的正確進行。
微生物檢驗室應備有紫外燈、自動感應洗手消毒裝置或腳踩式洗手消毒設施,有條件的無菌室應配置風淋裝置,配有緩沖間,最好設置推拉門,以防止空氣震蕩太大。檢驗人員進入無菌室前應穿戴已滅菌的工作衣、帽、口罩,在檢驗任務未完成前不得隨便進出無菌室。
定期對操作環境進行消毒并監控消毒效果,無菌室采用紫外燈滅菌或其他有效的方法,超凈工作臺需提前半小時開機,當環境不符合要求時,應立即停止檢測工作直到環境恢復到滿足要求為止。
微生物檢驗室應制定完善的衛生管理制度,工作人員必須每天堅持做好環境衛生工作,檢驗結束及時清理余物,做好所用工器具和臺面的清潔消毒工作。實驗廢棄物應及時清理,所有棄置的實驗室生物樣本、培養物和被污染的廢棄物必須通過高壓消毒或其他認可的方法處理,達到生物學安全后,方可運出實驗室。
3、儀器設備的質量控制
微生物檢驗中常用到的儀器設備有高壓滅菌器、干熱滅菌器、電子天平、顯微鏡、生化培養箱、超凈工作臺、生物安全柜等,儀器設備應建立使用維護保養操作規程。儀器設備使用人應依照操作規程進行操作并做好登記。如果溫度直接影響分析結果或對設備的正確性能來說是至關重要的,實驗室應定時監控這類設備的運行溫度,并做好記錄。高壓滅菌器應使用相應指示條監控設備的滅菌效果并做好記錄。儀器設備應定期維護保養,確保其良好工作狀態。生化培養箱、超凈工作臺、生物安全柜等設備還應定期清潔并充分殺菌,以防雜菌污染影響結果的判斷。
計量器具如電子天平、高壓蒸汽滅菌器的壓力表、培養箱與冰箱的溫度計等應定期委托有資質的計量部門進行校準或檢定,校準或檢定合格在有效期內使用,計量器具校準或檢定應建立檔案以備溯源。對某些使用非常頻繁或性能不夠穩定,對檢測結果的準確度和有效性有影響的儀器設備,使用者應定期按儀器設備的相關規定進行期間核查或校準。對于貴重儀器和設備,在使用前應加以檢查,使用后要登記,要作到定期維護,以保證儀器處于良好的工作狀態[5]。
儀器設備的狀態應正確對其標識,防止使用有故障的儀器設備。無菌工器具和器皿應按規定存放在指定的區域并標識,與非無菌工器具和器皿加以區別。經生物污染后的儀器設備應標識以防誤用。
4、培養基和關鍵試劑的質量控制
4.1 培養基的質量控制
食品微生物學檢驗中用的培養基、染色液、指示劑等嚴格按照國家標準GB4789.28-2003規定的方法進行配制[6],各種試劑純度應在分析純級以上。制備培養基必須在玻璃容器、搪瓷缸或鋁鍋中進行,不宜采用銅或鐵器皿,否則會抑制微生物的生長,配制時應按國標規定的配方和順序添加,使用蒸餾水或去離子水,避免使用自來水,配制完畢還應按國標規定調整pH值,一般用1mol/L的鹽酸或氫氧化鈉進行調節,避免使用濃酸/堿以免破壞培養基成分,配制好的培養基應及時殺菌并盡快使用,使用不完的,如無特殊需求,可室溫或低溫2-8℃保存,如用塑料袋密封,保存期可延長,有長菌、產酸、產氣等被污染跡象或干裂現象的則不能再使用。
新購入的培養基或每批新配制好的培養基在使用前,應用參考菌株做驗證試驗和無菌培養。驗證試驗是指按不同的培養基接種相應的參考菌株,觀察菌株在此培養基上的生長、菌落形態、生化、動力學、溶血等特征,看特征現象是否明顯,據此判斷培養基是否符合要求。無菌培養是指將已滅菌的培養基放入37℃的培養箱培養48h(對于細菌培養基)或放入28℃的培養箱中培養5-7天(對于細菌培養基以外的其他培養基如霉菌用培養基),以檢查滅菌是否徹底。
目前,微生物檢驗中普遍采用的是成品干粉培養基,采購這些干粉培養基應注意:(1)干粉培養基必須是專業正規廠家生產,產品質量必須符合有關的國家標準或企業標準,購買時應索取相應的資質證明和檢驗報告。(2)干粉易受潮結塊變性,保存應符合相關要求。為保證干粉培養基質量指標,在實際使用時盡量縮短開蓋時間,加強包裝的密封性能,一般干性培養基放在低溫干燥的環境中如冰箱的冷藏室保存,對于易受潮的品種,啟用后宜放入干燥器中保存并盡快短時間內使用完畢,由于配制水分不同或啟用次數增加,干粉培養基的pH值可能會有所變化,最后應隨時略加調整。(3)購入商品化即用型培養基應注意:為保證培養基的質量,生產時一般采用真空包裝,購入時應對其外觀檢查,檢查包裝袋是否破損漏氣,培養基是否開裂、平皿有無破碎、血平板有否溶血、有否冰凍、傾注是否均勻、有否過多的氣泡等,清晰度和有無污染也需要檢查,還要向廠家索取相應的資質證明和檢驗驗證報告,使用時可不必對培養基進行大量的驗證工作,但應保證其儲存條件。
4.2 關鍵試劑的質量控制
微生物檢驗用的相關試劑純度也要求在分析純(AR)級以上,在利用藥品、試劑配制染色液、緩沖液及其他試劑時應注意:按要求選取溶劑,用帶塞的試劑瓶盛裝,易分解的試劑宜用棕色瓶,揮發性的試劑瓶口應予密封,如發現溶液有變質現象,應停止使用,標準溶液應定期標定。實驗室內保存的試劑應定期進行清點,陳舊或損壞的試劑應棄去,注意保存試劑的使用有效期以及最佳保存方式。染色液配制后,必須選用適當的參考菌株作陽性及陰性對照來鑒定染色液的性能。
致病菌鑒定分型使用到的生化診斷試劑和血清應從正規生物試劑廠家購買,使用時應注意試劑及血清的有效期,使用前用相應的參考菌株做確證試驗,合格后方可使用。過期血清和變混濁的血清不應繼續使用。血清一般保存在普通冰箱的冷藏室內,切忌凍結,使用時應盡量短時間暴露于空氣中,以免污染。
試驗用參考菌株必須從認可的菌種收集途徑獲得,購入時應索取相應的證明材料。參考菌株必須保存于帶鎖冰箱中,雙人雙鎖制度,確保菌株安全。購買的菌株必須用驗證合格的培養基做確認試驗,按購買的菌株不同形態(干粉、凍存管),在肉湯或血平板上復蘇、鑒定后使用。參考菌株應于規定時間內傳代并進行確認,注意菌株有無污染和變異,如發現污染和變異時,應及時更換。
5、抽樣和樣品的質量控制
整批食品的微生物學衛生狀況是通過對樣品的微生物學檢驗來評價的,因此,抽樣十分重要。抽樣時應注意如下問題[7]:(1)抽樣工具和容器宜選用耐消毒滅菌的材料,如玻璃、不銹鋼、牛皮紙等,使用之前應進行認真清洗、干燥和滅菌處理,但不能用消毒劑消毒,樣品中不得加入防腐劑,以免影響結果的正確性。抽樣可使用一次性無菌樣品袋采集。(2)在嚴格無菌操作的條件下,按國標GB4789.1-2008均勻而準確地抽樣,及時封口,使樣品具有準確性和代表性。(3)每件樣品封口后,貼上標簽,做好記錄(如樣品名稱、采樣地點、時間、數量、抽樣或送檢單位及姓名,及衛生狀況等)。采集后的樣品應及時送檢,如果樣品是冷藏食品,應保持冷鏈送檢。(4)抽樣數量不能少于全部檢驗需要量的3倍,以供檢驗、復檢、備查。
微生物檢驗室在收到送檢單和樣品后,接樣人應認真核對登記并注明樣品的檢測狀態,確保樣品的相關信息完整并符合檢驗要求。微生物檢驗室應按檢驗要求及時準備條件、組織力量進行檢驗。送檢的樣品如無法及時檢驗,微生物檢驗室應采取必要的措施保持樣品的原有狀態,防止樣品中目標微生物因客觀條件的干擾而發生變化。一般樣品宜保持在0-5℃的冰箱中,對于冷凍食品應保持在冷凍狀態,直到檢驗為止,冷凍樣品應盡快放在冷藏的溫度下解凍。從容器中取出樣品、稱取樣品及預處理均應遵循無菌操作原則,防止污染。
檢驗后樣品的保存,保存條件和保存時間應按規定執行,保存期滿后按有關規定處理樣品。對檢出致病菌的樣品要經過無害化處理,一般采用高壓滅菌,確保樣品中致病菌不會傳播擴散。
6、檢驗的質量控制
檢驗方法一般采用國家標準和出入境檢驗檢疫行業標準,如果樣品送檢時客戶制定了其他的檢驗方法,則需利用參考菌株對檢驗方法做確證試驗。除按國家標準方法對所需檢驗項目進行檢測外,在實際工作中還應
注意以下幾個方面,否則會影響檢驗結果的準確性:(1)在定量檢驗時樣品一般采用重量法或體積法稱量,但兩者的檢驗結果存在一定的誤差,因為比重不等于1的樣品,lmL和1g的樣品檢驗結果絕不會相等。一般固態的樣品宜用重量法,液體樣品宜用體積法。但對于黏性液體(如調味醬),如用體積法,會粘附一定量的樣品在吸管上,因此此類樣品最好用重量法。(2)如樣品需用無菌水或無菌生理鹽水稀釋,最好用均質器或組織搗碎機制成均勻的菌懸液。(3)如樣品含油脂成分較高,直接使用無菌生理鹽水稀釋不能制成均勻的菌懸液,可在配制生理鹽水時加入少量適當的乳化劑一同滅菌,這樣當樣品稀釋時就易制成均勻的菌懸液。(4)樣品稀釋時,常會滯留少量樣品在吸管壁內外,應多加注意。吸管插入樣品或稀釋液中應深淺一致,否則會影響檢驗結果,吸入液體后,應沿管壁慢慢注入遞增的稀釋液中,特別注意此時吸管尖端切不可碰到稀釋液中。每遞增稀釋一次,即換用一支滅菌吸管。(5)在培養基傾注入檢樣、菌懸液時,注意培養基溫度宜在45℃-50℃之間,并使培養基與檢樣、菌懸液充分混合。(6)微生物培養時,應根據微生物生產的特性選擇正確的培養溫度和時間。(7)應用無菌水或無菌生理鹽水作空白對照,如果在空白對照中檢出細菌,則可認為培養基質量存在問題或在操作過程中存在污染情況。另外,采用參考菌株作陽性對照,觀察培養基的質量情況。(8)整個檢驗過程應嚴格遵守無菌操作。(9)及時檢查結果,做好原始數據記錄。
7、結果報告的質量控制
7.1 對原始數據進行計算整理,去除不必要的誤差,獲得準確的數據,處理某些檢測項目數據時還應考慮檢測結果的不確定度如菌落總數;
7.2 編制檢驗報告要求:主題明確——符合檢樣要求和分析目的;內容準確——定性判斷和定量計算應準確無誤;文字簡明——文字、表格簡潔明了,表達適當;書寫清楚——菌類名稱(學名)、有關數字及其它文字說明必須書寫清楚。
7.3 檢驗結果應按照標準的要求進行報告:(1)定量檢測如在100以內,按“四舍五入”的原則修約,按二位有效數字報告,大于100 時,以N×10n 表示,N 為按“四舍五入”原則修約后的兩位有效數字;(2)對定性檢測的報告,應用漢字“25g樣品中檢出或未檢出××菌”或標準要求的其它方式表示。(3)在做大腸菌群檢驗時如最低稀釋度為100(即在3支雙料LST肉湯管中每支接種10 -1樣品勻液10mL),查標準中大腸菌群最可能數(MPN)檢索表時應將表內數字相應降低10倍報告成MPN/g,或將表內降低10倍的MPN值乘100報告成MPN/100g。如最低稀釋度為10 -1,結果只能按檢索表報告成MPN/g,而不能將查檢索表得到的MPN/g數值直接乘100報告成MPN/100g,因為細菌在樣品中是非正態分布,而非線性分布[8-9]。
7.4 檢驗報告必須按規定的程序進行復核,并依照相關標準對送檢樣品給出進行全面準確報告,必要時給出評價和合理的解釋。有關人員核實簽字后,加蓋檢驗單位印章,經授權簽字人簽發生效。這樣,才能使檢驗結果既有法律依據又有學術依據。
8、實驗室內外部的質量控制
為保證檢驗結果的可靠性和準確度,實驗室應定期舉行內部質量控制,除了上述提及的質量控制因素外,還應舉行如人員比對、儀器比對、重復試驗、盲樣測試等方式的質量控制。還應參加外部質量控制活動,包括參加能力驗證計劃、實驗室間比對試驗等。實驗室間的質量控制可在國內外范圍進行,有能力的微生物實驗室應力爭參加國際間質量控制活動,建立良好的檢驗聲譽。
總之,食品衛生微生物學檢驗的質量控制涉及面甚廣,目前尚無統一規范,除了本文提及的因素外,日常仍有大量細致的工作要做。要使微生物檢驗的質量控制日臻完善,仍需廣大檢驗人員的共同努力,不斷積累經驗。
參考文獻:
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關鍵詞: 衛生理化檢驗學實驗 課程建設 實驗教材 實驗課題 教學改革
衛生理化檢驗及實驗是高等醫藥院校預防醫學、醫學檢驗、生物技術、生物科學的專業課。溫州醫科大學在2001年開始在衛生檢驗專業中開設衛生理化檢驗及實驗課程。在開設該課程之初,其教學內容按空氣理化檢驗、水質理化檢驗、食品理化檢驗三個獨立部分進行教授;2001年起在預防醫學、醫學檢驗等專業中開設衛生理化檢驗課程,并把空氣理化檢驗、水質理化檢驗、食品理化檢驗三個獨立部分有機組合后進行授課;2014年完成浙江省重點建設教材《衛生理化檢驗》編寫并正式出版。近七年的教學實踐表明,衛生理化檢驗學在預防醫學等專業教學中發揮了重要作用,收到了良好效果。隨著理論教學的不斷深入,衛生理化檢驗實驗課程體系的建設提上日程。本文就實驗教材建設、實驗教學改革、多媒體實驗教學平臺的構建進行了探索,以期進一步提高衛生理化檢驗實驗教學水平。
一、衛生理化檢驗實驗課程建設的緊迫性和必要性
1.目前尚未正式出版適合預防醫學類本科專業使用的實驗教材
衛生理化檢驗是實踐性很強的一門學科,在前幾年的實驗教學中,我們自編了一本教材用于實驗教學,使學生通過實驗課程的學習掌握了一定的實驗知識和實驗技能。但無論是教師還是學生都普遍感到自編教材只羅列了幾個要做的實驗,缺乏一些實驗的基本理論和基本操作技能說明。此外,近年來衛生理化檢驗工作發展迅速,新的檢測項目和新的技術不斷出現,現有的實驗教材中部分檢驗方法和與實際需求脫節。因此,重新編寫一本適合本科教學的實用教材并正式出版顯得十分必要。
2.衛生理化檢驗實驗課題效果有待提高
衛生理化檢驗實驗的教學要求學生具有較好的化學分析和儀器分析實驗技能,但預防醫學、醫學檢驗、生物技術、生物科學等專業由于專業設置的差異,所掌握的化學分析和儀器分析實驗技能并不相同。課題組在實驗教學中發現:(1)學生在實驗過程中,大部分是按方抓藥,真正的動手能力并不強;(2)雖然學過了典型物質的分析方法,但遇到實際樣品尚難以完全獨立完成檢測;(3)在預習衛生理化檢驗相關實驗時,要完全將教材上的實驗步驟和實際的操作對應起來存在一定困難,多屆學生均詢問能否提供一個關于實驗教學的多媒體教學軟件,通過視頻的實驗演示使實驗預習取得更好的效果。這些教學過程中反映出來的問題促使課題組將衛生理化檢驗實驗教學改革和多媒體教學平臺構建提上日程。
二、衛生理化檢驗實驗課程建設的內容
1.實驗教材建設
在原來的自編教材基礎上增加衛生理化檢驗基礎知識和基本技能介紹,注重空氣、水質、食品理化檢驗三部分內容的協調性,注意培養學生的創新能力和實踐能力。新編的實驗教材內容包括總則(實驗室安全、實驗記錄、測定結果的表述)、水質理化檢驗(水中有機污染指標檢驗等15個實驗)、食品理化檢驗(食品營養成分檢驗等23個實驗)、空氣理化檢驗(氮氧化物測定等8個實驗)、附錄(常用理化檢驗實驗技術、常用標準溶液的配制與標定、常用緩沖溶液的配制等);在常用理化檢驗實驗技術中,著重介紹容量分析、光譜分析、色譜分析、電化學分析等具體實驗技術要領,方便學生實際操作。
2.實驗教學改革
(1)安排學生參與實驗的準備工作
試劑的配制、標準液的標定、儀器的安裝和進行預實驗等實驗前的準備工作,在以往的教學中是由教師完成,學生往往不予重視。實驗前準備是實驗成功的保證,在實際工作中必須由檢驗人員完成。因此,每次實驗前都輪流安排幾個學生在教師的指導下動手準備,這有利于學生進一步熟悉各種化學試劑的理化性質及相關儀器的使用方法。另外,由于學生少,教師易發現其操作上存在的問題,及時給予糾正,有效培養學生的實驗能力,強化實驗教學效果。
(2)嘗試PBL教學法
以問題為基礎的學習(Problem-Based Learning,PBL)是由美國神經病學教授Howard Barrows于1969年在加拿大麥克瑪斯特(McMaster)大學醫學院首先試行的一種新的教學模。PBL教學在學習成績、學習能力方面都優于采用其他教學方式的學生,尤其在培養學生自主學習能力、分析和解決問題能力等方面非常有效[1]。在衛生理化檢驗實驗教學中,我們參照文獻[2]采用PBL教學法進行試點,發現PBL教學法受到大部分學生的歡迎。通過PBL教學,學生自主學習能力提高,掌握正確的學習方法和思維方法,通過文獻檢索閱讀,對書本以外的新知識、新觀點、新領域等進行研究探索,達到研究性、創新性學習的目的。
(3)模擬實際進行實驗考核
在期末模擬實際工作進行實驗考核,讓學生從采樣做起,并根據樣品的來源、特點及檢驗目的,獨立思考、選擇檢驗方法,獨立完成操作過程、報告結果;按統一評分標準進行評分,促使學生認真對待實驗教學,重視每一次實驗課,在實驗中自覺養成科學的工作習慣,自覺加強各種實驗操作的規范化訓練,努力掌握各種實驗技能技巧。
3.衛生理化檢驗實驗多媒體教學平臺構建
我們曾構建《衛生理化檢驗――食品部分》多媒體教學平臺,該教學平臺獲得溫州醫科大學教學課件比賽一等獎,近幾年我們在此教學平臺的基礎上添加空氣理化檢驗和水質理化檢驗的實驗視頻內容,使其更完整,每個視頻內容分原理講解、實驗器材、操作示范等內容,使學生進入實驗室前就對即將開展的實驗有詳細了解,增強實驗預習效果,并有助于日后復習。
三、結語
預防醫學類本科專業的衛生理化檢驗實驗教學課程體系建設在全國沒有先例,沒有現成的模式可以參照。我校雖然在2001年開始就在衛生檢驗專業中開設衛生理化檢驗實驗課程,但在近幾年才開展衛生理化檢驗實驗教學課程體系建設的系統研究。本文就實驗教材建設、實驗實驗改革、衛生理化檢驗實驗多媒體教學平臺構建等方面進行初步探索,期望此項工作的推進能切實提高衛生理化檢驗實驗教學水平。
參考文獻:
[1]劉夢蓮.基于問題式學習(PBL)的設計[J].現代遠程教育研究,2003,64:39-43.
關鍵詞 :衛生檢驗 差錯 對策
引言
由于科室檢驗人員無論從知識結構、年齡構成、工作能力等方面看,都還未形成具有一定規模的人才梯隊,在衛生檢驗工作中出現了各種各樣的差錯,筆者對檢驗設備、試劑、檢驗樣品及人為因素等方面造成檢驗工作產生的差錯進行總結,以達到盡量減少偶然誤差和系統誤差的目的。
1 、 在儀器與試劑方面
1.1 出現差錯的原因
(1)對儀器功能原理不夠理解 由于對儀器各部位的名稱和功能原理及顯示信號的含義不是十分了解,而且在同一實驗項目更換不同廠家所生產的試劑時,沒有依照試劑說明書上的要求改變不同的參數,致使實驗結果出現系統性的誤差。
(2)儀器保養不到位 由于儀器保養不善及儀器內部一些零部件老化、損耗,沒有及時發現而引起的實驗結果差錯。
(3)試劑與儀器設備不相匹配 由于所用試劑與儀器設備的要求不符,如進口儀器在嚴格意義上講應使用與其相配的試劑,使用國產試劑或其他試劑均會影響到其實驗結果及儀器的穩定性。有時會對儀器造成一定的損害。
1.2 應采取的方案
(1)專人負責 為避免以上出現的差錯,對于高檔儀器,應規定專門的負責人,相對固定操作人員。每個操作人員應熟悉儀器的工作原理、性能、特點、測定方式和方法,各種信號顯示的含義簡單故障的排除方法。
(2)建立操作卡片 從儀器的開機至關機(包括暫停)的全過程,每一步驟均應按照操作卡上的指導進行。
(3)應持續使用儀器 不應在一周內某個特定的時間使用。許多單位為愛護儀器,怕其疲勞而間斷使用,反而帶來不少的麻煩。比如儀器內液揮發而造成管道不通及小孔堵塞等。實際上儀器是不怕疲勞的,建議在常規工作中使用的儀器日間不必關掉電源,每日8h~10h工作不會出現任何問題。
(4)試劑要與儀器匹配 高檔的進口儀器其使用試劑比較嚴格,在無進口試劑的條件下,應想方設法使試劑接近進口試劑。
(5)記錄 儀器應有日常使用記錄、質控記錄和質控圖、故障及排除記錄和維修記錄。
(6)定期維護 定期對各種儀器做日常維護,并嚴格按照各種儀器的維修要求去做。
2 、檢驗標本的采取和處理方面差錯
2.1 出現差錯的原因
樣本采集方法與技術直接影響檢驗結果的可靠性,即如果樣本采集不合理,后續的分析方法和儀器即使很先進,也仍然得不到可靠的結果。檢驗樣品的采取和處理方面的差錯主要有:
(1)樣品采集無代表性 采樣時,要求所采集的樣品有代表性,應代表所來自的總體。而不少采樣過程中,采樣人員忽視了樣品的代表性,采樣時往往帶有采樣人員的主觀性,挑選采樣人員潛意識中合格或不合格的樣品,或者為了方便省事,沒有嚴格地隨機抽取樣品。
(2)采集樣品的過程中被污染 主要是由于沒有嚴格使用合格的采樣工具,或沒有嚴格地按照采樣程序采樣。如微生物樣品要求無菌采樣,但采樣人員沒有使用經過驗證無菌的采樣工具,或者沒有嚴格地無菌操作。
(3)樣品保存不當的問題 許多樣品都有保存方面的要求,如果沒有合理地保存樣品,樣品的質量就會發生很大的變化,檢驗結果也就出現差錯。這方面容易出現的問題主要是沒有控制好溫濕度、光照以及空氣環境等因素。許多藥品需要避光低溫保藏;如暴露在強光或高溫下,成分就會發生變化。檢驗微生物的樣品要注意無菌包裝的完好,并且低溫保藏防止微生物的增殖,有條件的還要盡快檢驗,盡量縮短樣品在分析之前的保存時間。
2.2 對策分析
(1)加強監督管理 為了進一步提高藥品檢驗的質量和水平,藥監部門應當按照有關規定的要求加大對藥品檢驗的監督檢查力度,以此來促進藥檢機構按照規定要求購置相關的檢驗儀器和設備,并配備高素質的藥品檢驗人員,并以GMP的要求作為工作依據,不斷加大藥品檢驗質量控制的力度,以此來確保藥品的質量。
(2)強化檢驗能力 藥檢機構應當對藥品檢驗工作的重要性予以足夠的認識,并嚴格遵守GMP的相關要求,不斷加強管理,完善制度,將確保藥品檢驗質量落實到每一個人身上。同時,還應根據相關的質量標準要求,配備有關的儀器和設備,實現所有藥品的全項目檢驗。此外,還應提高藥品檢驗隊伍的業務能力和技術水平,加強對藥品檢驗人員的培訓,這對于提高藥品檢驗質量有著十分重要的意義。
(3)應用計算機技術進行藥品檢驗 計算機的一些應用軟件在日常工作中也發揮了巨大的作用,如WINDOS操作系統下的EXCEL電子表格處理軟件對數據的管理,利用圖表可以直觀地反映某一時間段的樣品檢驗情況、檢驗結果等對一些數值的計算也非常方便,省去了編程這一復雜的工作過程。
3、人為因素方面
3.1 差錯
(1)由于樣品員的粗心,造成進入實驗室的樣品標識不清或無唯一性標識,致使檢驗結果無可信性或使樣品的檢驗無法進行。
(2)樣品檢驗后, 對經過稀釋的樣品,報告結果時沒有乘稀釋倍數。
(3)檢驗原始記錄沒有在檢驗過程中隨時填寫, 而是在檢驗結束后再進行填寫,又沒有經過復核,造成原始記錄數據出現差錯。
(4)在編制報告時,沒有與報驗單、流程卡及原始記錄校對,出現檢驗報告與報驗單、流程卡及原始記錄上的內容不符或把檢驗結果填錯。
(5)沒有仔細核對檢驗報告與樣品的基本情況,在檢驗報告上出現與樣品名稱、產地、采樣地址等項目不相符的差錯。
(6)不按SOP 文件規定的程序進行檢驗或報告, 出現漏檢或漏填寫的報告。
(7)不按有效數字修約規則進行數字修約,造成檢驗報告結果不規范。
3.2 對策
(1)建立和完善實驗室質量管理和質量控制相關制度, 組織全體檢驗人員加強學習,提高規范化操作和質量控制意識。
(2)對于由于檢驗人員責任心不強而出現的差錯,作為科室領導應對其進行恰當的批評教育,并提出合理性的建議,指出應改進及今后努力的方向。
(3)對于由于檢驗技術方面原因出現的差錯,科室主任、技術負責人或質量負責人要及時會同檢驗人員進行總結,查找相關技術資料,并組織相關人員進行學習, 逐步提高檢驗人員的檢驗能力。
(4)對于由于心理因素而造成差錯的檢驗人員,應仔細分析其原因。其中生理疲勞與心理因素有關,情緒的好壞,是否有心理負擔,對工作是否有興趣,都會造成檢驗人員生理疲勞的產生,而消極情緒是心理疲勞產生的重要原因,還有工作中人際關系的不協調感、事業上的挫折感、生活上的失落感、從事簡單工作的單調感和長期從事一定工作的厭煩感,都容易導致檢驗人員產生心理疲勞,由此可表現出檢驗人員精神不佳,遇事煩燥,工作效率低,而且在工作中容易出現差錯。做為科室負責人 應在查清原因后,及時采取相應措施 防范差錯事故出現。
結語
衛生檢驗工作是一項技術要求高,又比較細致的工作。認真細致并消除煩燥情緒是避免由于人為原因造成差錯的最有效辦法。這就要求檢驗人員不但要有科學的態度,嚴肅認真、一絲不茍的工作作風,而且要熟練地掌握科學檢驗技能,規范地進行各項檢驗操作,不斷提高檢驗數據的科學性和準確性。
動物性食品衛生檢驗項目教學任務《動物性食品衛生檢驗》是關于動物屠宰加工,常見傳染病鑒定與處理,動物性食品加工與檢驗,動物性食品污染與控制等內容的學科,它既與獸醫科學、食品科學、公共衛生等學科密切相關,又是獸醫科學前沿的極具潛力的獨立學科,也是一門專業性、技術性、實踐性很強的實訓科學,是動物防疫與檢疫專業的必修課。
1課程的定位
1.1課程的性質和作用
動物性食品衛生檢驗是動物防疫與檢疫專業的專業核心課程。本課程是以動物醫學和公共衛生學的理論為基礎,從預防的角度出發,研究肉蛋乳等動物性食品的生產、加工、存,運輸銷售及食用過程的衛生監督及衛生檢驗,以保障使用者安全、防止人畜共患病和其他動物疫病傳播的綜合性應用學科。通過本門課程的學習,為我國的動物及動物產品的檢疫檢驗崗位培養合格的檢疫檢驗人才。
1.2課程的教學目標
突出能力與素質并重的培養目標,使學生掌握動物性食品衛生檢驗必備的基礎理論知識,著重培養學生掌握畜產品企業質量品控員、動物性食品加工工應知的理論、應會的技能,如能根據不同種類動物的特點制定合理的檢疫方案、能夠對屠宰加工流程中的檢驗工作進行技術指導,能夠對常見的動物性食品進行衛生檢驗,具備一定的生產項目的管理能力,同時具有較好的自主學習的能力、較好的邏輯思維和知識運用的能力,具備敬業愛崗、團結協作的能力、具備吃苦耐勞、學檢愛檢的勞動品質和環保及自我保護意識,把學生培養成食品企業產品質量控制崗位的高技能人才。
2課程設計的理念與思路
2.1課程設計的理念
以崗位的職業能力培養為核心,在教學過程中,做到教學目標與工作任務相對應,在工作任務重融入相應的職業標準,并且按照屠宰過程設計檢疫檢驗流程,把學生培養成會看會檢嚴執法的檢疫檢驗人才。
2.2課程設計的思路
2.2.1針對崗位職業能力設計教學目標
使學生掌握動物性食品常規的檢驗的技術,同時具備法律安全意識,熟悉國家有關食品的法律法規和動物性食品衛生的相關標準,如動物防疫法、生豬屠宰管理條例、食品安全法等,把學生培養成具備高水平檢驗技能和良好的職業素養的高技能人才。
2.2.2教學項目對接工作任務
按照動物產品生產流通組織教學,教學項目劃分為五大項目,項目一畜禽的宰前檢驗,項目二屠宰加工過程中的檢驗,項目三畜禽的宰后檢驗,項目四畜禽病的檢驗與處理,項目五肉蛋乳的衛生檢驗,對接相應的工作任務,其中項目一、項目二、項目三、項目四對接動物宰前、屠宰中、屠宰后的檢疫檢驗任務,項目五對接主要動物性產品的檢驗。
2.2.3將職業標準融入工作任務
將獸醫化驗員、畜產品檢驗工、動物檢疫檢驗工、乳品檢驗工的國家標準融入相應的工作任務中。
2.2.4按照屠宰過程設計檢疫檢驗流程
宰前檢疫包括收購檢疫、運輸檢疫,屠宰加工檢驗包括淋浴、致昏、放血、燙毛、褪毛、凈毛、頭部檢驗、開膛、凈膛中的檢疫檢驗,宰后檢驗包括“紅下水”的檢驗、“白下水”的檢驗、旋毛蟲檢驗、胴體檢驗、皮膚檢驗、肉及肉制品的檢驗包括品質異常肉的檢驗、冷凍肉的檢驗、熟肉制品的檢驗、肉類罐頭的檢驗,其他動物性食品的檢驗只要包括乳及乳制品的檢驗、蛋及蛋制品的檢驗,從而完成整個檢疫檢驗流程。
3教學內容的組織與安排
由改革前的分散章節整合為基于工作過程5大項目:畜禽的宰前檢疫、屠宰加工過程中的檢驗、畜禽的宰后檢驗、畜禽常見傳染病、寄生蟲病的檢疫與處理,而后又劃分為20個學習性的工作任務。任務一:畜禽的收購、運輸檢疫;任務二:屠畜禽的宰前檢驗;任務三:屠畜(豬)屠宰加工工藝的衛生監督;任務四:家禽屠宰加工工藝及衛生要求;任務五:生產人員的個人衛生與防護;任務六:屠畜(豬)宰后檢驗方法;任務七:屠畜(豬)被檢淋巴結的選擇和淋巴結的常見病變;任務八:屠畜宰后檢驗的處理;任務九:家禽的宰后檢驗;任務十:畜禽常見傳染病的檢驗與處理;任務十一:畜禽常見寄生蟲病的鑒定與處理;任務十二:冷凍肉的衛生檢驗;任務十三:分割肉的衛生檢驗;任務十四:腌制肉的衛生檢驗;任務十五:肉類罐頭的衛生檢驗;任務十六:熟肉制品的衛生與檢驗;任務十七:鮮乳的衛生檢驗;任務十八:乳制品的衛生檢驗;任務十九:蛋的衛生檢驗;任務二十:蛋制品的衛生檢驗。
4總結與體會
動物性食品衛生檢驗教學改革,在基本技能的訓練方面通過開放實訓室,使學生有更多時間練習實訓操作,有更多時間參與實訓過程,開放實訓內容,使教學項目與實踐技能緊密結合,符合人才培養的要求。
4.1構建適合于人才培養要求的知識和技能體系
動物性食品衛生檢驗教學體系所涵蓋的內容,不僅涉及感官檢驗也涉及理化學檢驗,而且還涉及法律法規的相關知識。如何使學生在充分掌握理論知識的同時,將各自獨立的知識通過跨學科實踐項目有機的結合起來,使學生們系統全面的掌握動物性食品衛生檢驗知識的技能。
4.2構建適應培養應用型創新型人才培養需求的教學模式
傳統的實踐教學是以學校實訓室為主要實習場所,以教師演示實訓為主,學生實訓多為機械模仿、被動接受。這種教條式的教學模式嚴重的約束了學生行為,限制了學生的思維發展,妨礙了學生對事物本質的認識,扼殺了學生創造性,達不到實習目的,收不到良好的教學效果。我們采用指導、啟發、探索三個階段的教學方法,摒棄了以往老師全程帶領、學生機械模仿、被動接受的教學方式,使學生們對每一個教學項目都有全面系統的掌握;再通過自己的動手操作、過程的實施,,使學生的觀察能力、分析能力以及表達能力得到了全面的訓練,培養了學生的創新意識和解決問題的能力,充分發揮了學生在實訓教學中的主體地位。
4.3突出了實踐項目考核的操作性、應用性及法規性
通過教學項目的綜合訓練,特別是采取了現場實習或者模擬現場實訓,使實踐教學更接近生產實際,體會到了實際工作的復雜性,領悟到了動物性食品衛生檢驗的可操作性和應用性以及相關法規性的實際意義。
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1、衛生檢驗在食品安全應急工作中的作用
衛生檢驗擔負著包括食品安全在內的全部公共衛生突發事件的應急檢測任務。它是食源性疾病、食物中毒和食品污染事故鑒定的技術支撐。它的檢測水平代表著疾控機構處理食品安全事故的業務水平和能力。它提供的數據是具有法律效力的科學依據。在分析判斷危害因子、確定毒性級別、控制事故發展和搶救治療病人中都起著非常重要的指導作用。
2、衛生檢驗工作的現狀
2.1機構設置與人員狀況
目前,衛生檢驗部門均屬各疾控中心的內設機構,沒有獨立的法人,一切從屬于疾控中心法人的領導。隨著食品監測任務劃出以后,衛生檢驗就不能給單位帶來大筆的經濟收入了,因此受重視的程度大打折扣。人員配備、崗位設置、學術梯隊建設以及應急處理的“核心能力”人才培養都受到了許多不該有的制約。衛檢人員占疾控機構總人數的比例低,檢驗人員較其他科室人員的待遇差,培訓進修少,信息不暢通,許多學檢驗的專業人員都不愿再干該工作,造成了僅有的人才資源不斷流失,嚴重地影響了食品安全檢測科研活動的開展,也影響了處理食品安全事故的能力建設。
2.2儀器設備狀況
眾所周知,應急檢測最重要的是定性準確與快速。而儀器設備則是應急檢測最基本的技術保障,也是衛生檢驗科學發展的必備條件。2003年SARS發生以后,國家項目資金給各級衛檢實驗室配置一些常規儀器,如:氣相色譜、原子吸收、原子熒光、紫外可見、極譜、各種級別的電子天平、顯微鏡、培養箱以及生化分析儀、酶標儀等。但用于應急檢測的大型儀器如:氣-質聯用,液-質聯用、紅外光譜、微生物快速鑒定儀、熒光免疫分析儀等卻非常缺乏,大多數市、縣級衛檢實驗室都沒有。疾控機構的領導一般也不愿自己籌錢去購買。另外,各個食品安全監管部門的資源分散,僅有的設備利用率也不高,你有的大家都有;你沒有的大家都沒有。許多的食品安全危害因子不能就地檢測和快速檢出,影響了突發事件的定性和搶救治療病人的速度,有時還會付出生命的代價。
2.3質量監督與管理狀況
現在,大多數疾控機構的衛檢實驗室都通過了計量認證,少部分實驗室還通過了國家實驗室認可。但質量管理和體系運行仍然存在著不少問題。如:內審和管理評審不能按期舉行,開展了也流于形式;有的單位質控科根本就無專人管理,質量監督和控制不能有效進行。在實際工作中,重檢驗文書管理,輕采樣檢測過程;重報告結果數據,輕量值溯源過程;重儀器檔案收集,輕運行狀態檢查的現象非常普遍。還有食品安全檢驗方法的書籍和標準購買難,許多不安全事故發生了還找不到檢測方法和標準依據。因而也導致了應急檢測水平不高,不能及時準確的發出檢測信息,滿足不了食品安全應急工作的正常需要。
3、抽樣方法
3.1簡單抽樣方法
根據GB10111-88《利用隨機數般子進行隨機抽樣的方法》規定,簡單隨機抽樣是指從“含有N個個體的總體中抽取n個個體,使包含有n個個體的所有可能的組合被抽取的可能性都相等”。它是完全不帶有主觀限制條件的隨機抽樣方法,操作時可將批內的每一個單位產品按1到N的順序編號,根據獲得的隨機數抽取相應編號的單位產品,隨機數可按國際用擲般子、或者抽簽、查隨機數表等方法獲得。
3.2分層隨機抽樣
如果一個批是由質量明顯差異的幾個部分所組成,則可將其分為若干層,使層內的質量較為均勻,而層間的差異較為明顯。從各層按一定比例隨機抽樣,即稱為分層隨機抽樣。
3.3系統隨機抽樣
如果一個批取產品可按一定的順序排列,并可將其分為數量相當的幾個部分,此時,每個部分按簡單隨機抽樣方法確定的相同位置,各抽取一個單位產品構成一個樣本,這種抽樣方法即為系統隨機抽樣。
3.4分段隨機抽樣
如果先將一定數量的單位產品包裝在一起,再將若干個包裝單位(例如若干箱)組成批時,第一段抽樣以箱作為基本單元,先隨機抽出K箱,第二段再從抽到的K個箱中分別抽取m個產品,集中在一起構成一個樣本,即稱為分段隨機抽樣。
3.5整群隨機抽樣
如果在分段隨機抽樣的第一段,將抽到的K組產品中的所有產品即作為樣本單位,此時即稱為整群隨機抽樣。
4、抽樣方法的應用
以蘋果為例加以說明,假如有一百箱蘋果,需要檢測錫的含量,而蘋果是在被鎬污染的地區出產的,每箱平均裝有2009左右的蘋果64個,100箱共6400個,總重量1280kg。分析鎬時,一次需要試樣509大約1/4個蘋果,如果隨機取一個蘋果,取1/4檢測,檢測結果為含福3PPm,正常標準值為小于IPPm,由此斷定100箱蘋果都不可食用,不能作為商品出售,這是不可行的,因為這1/4個蘋果是否能代表100箱蘋果是有疑問的。為了知道全部蘋果中錫的含量,必須取能代表所有蘋果的樣品,就要采用合理的取樣方法,具體方法如下:
(1)第一步是從100箱蘋果中任意地挑選出10箱,即先在箱上標上l-100的號碼,從中隨機取出10個,假如取出的是8,14,26,15,92,73,67,14,28,10這十個數,就選出這10箱蘋果。
(2)打開這10箱蘋果,從每箱中任意取出8個蘋果,方法是將每箱的64個蘋果編上號碼,從1-64號隨機取出8個號碼或者取出一個一位數的號碼,再每隔8個號碼選出7個蘋果,共8個蘋果,比如2,10,18,26,34,42,50,58。
(3)將前項(每箱8個共80個)取出蘋果混在一起,從中任意取出9個蘋果是可以代表這批蘋果的,完成抽樣過程。其他箱裝酒、奶、蛋等可參考蘋果的方法。
5、問題食品抽樣應用
5.1污染或懷疑污染的食品
一些食品在生產、運輸、貯存過程中往往易受到污染,抽取已證明污染或懷疑的典型性食品,同時抽取一些確實未被污染的同種食品作空白對照。
5.2摻偽或懷疑摻偽的食品
如發現市售干豆腐有許多黃色斑點,涼粉發藍、綠、彈性很強,應抽取典型樣品;發現辣椒面放在水中有明顯紅色,則應抽取部分典型樣品;如發現西瓜切開后,顏色不均勻則全部抽取,如有必要,抽取部分上述正常食品作對照試驗。
5.3中毒或懷疑中毒的樣品
引起食物中毒的樣品或懷疑造成食物中毒的樣品應抽取,還應抽取根據中毒癥狀、可疑中毒物質、性質、要求、抽取含量最多的樣品、中毒者吃剩的食物、餐具(未洗測)等典型性樣品。
參考文獻: